elisa試劑盒常用的方法有雙抗體夾心法、間接法、競(jìng)爭(zhēng)法以及BAS-ELISA等。該試劑盒的專(zhuān)一性強(qiáng)，抗原與抗體的免疫反應(yīng)是專(zhuān)一反應(yīng)，而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ)，所檢測(cè)的對(duì)象是抗原（或抗體），使用的抗體除標(biāo)記了酶以外，與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無(wú)多大差別。
elisa試劑盒主要檢測(cè)條件如下：
1.elisa加樣
elisa一般有3次加樣步聚，即加標(biāo)本→加酶結(jié)合物→加底物。凍結(jié)血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下倒置混和，不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑，而血清標(biāo)本只要待血清天然凝固、待其收縮后即可取得。也可在板孔中加入稀釋液，再在其加入血清標(biāo)本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。
一般說(shuō)來(lái)，5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃，超過(guò)一周測(cè)定的需低溫冰存?？捎米鱡lisa測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛，體液、分泌物和排泄物等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份，elisa試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保留。
2.固相載體
加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物用液時(shí)可用定量多道加液器，使加液過(guò)程迅速完成。如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴，以發(fā)生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。
好的儀器和準(zhǔn)確的操縱是保證elisa試劑盒檢測(cè)結(jié)果正確可靠的必要條件。elisa頂用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗滌的，應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定，有些則需經(jīng)預(yù)處理。
3.標(biāo)本因素
血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)留意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)開(kāi)釋出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為標(biāo)記的elisa測(cè)定中，溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。如在冰箱中保留過(guò)久，其中的可發(fā)生聚合，在間接法elisa中可使本底加深。
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更新時(shí)間：2022-05-16
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