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      Myla2059細(xì)胞

      產(chǎn)品簡介

      Myla2059細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:
      鵝去氧膽酸Clindamycin HCl 鹽酸克林霉素 通用型組織/衰老特異性β-半乳糖苷酶原位染色試劑盒
      蒽醌Colistin Sulphate 多粘菌素E硫酸鹽 微管蛋白聚合作用(polymerization)檢測試劑盒

      更新時間:2021-08-30
      訪問次數(shù):972
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      注意事項:
           盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
           如果有細(xì)菌或真菌污染,會嚴(yán)重影響檢測效果。
           染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
           如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗。
           熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進(jìn)行熒光觀察時,盡量縮短觀察時間,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
           用于流式細(xì)胞儀檢測時,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測,這樣通??梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞。
           需自備PBS。
           本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
           為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
      產(chǎn)品名稱:皮膚T淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞
      英文簡稱:Myla2059細(xì)胞

      貨號:LZ-X969815
      規(guī)格:T25
      生長特性:懸浮

      圖片2.jpg 

      我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價,產(chǎn)品貨期短,價格優(yōu),售后齊全。

      凍存培養(yǎng)基:
      凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
      1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
      2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
      培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
      以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
      1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
      2.凍存貼壁細(xì)胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
      3.采用、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
      4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細(xì)胞沉淀。
      注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
      5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
      6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
      7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低  1°C?;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

      圖片2.jpg 

      實驗報告:
      一、分離與培養(yǎng):
         1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;
         2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
         3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
         4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
         5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
      二、免疫熒光鑒定:
         1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
         2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
         3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
         4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
         5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
         6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微
      鏡下觀察圖像并拍照。
      實驗材料: 
      1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶 
      2. 100ml滅菌燒杯2個;
      3、50ml離心筒2個 
      4、滅菌培養(yǎng)皿1個,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
      5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個 
      6、細(xì)胞計數(shù)板1塊; 
      7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把; 
      8、酒精燈1臺;

      鬧達(dá)柯裂亭Bis Benzimide Hoechst NO33258 熒光染料基因甲基化特異性PCR擴(kuò)增(MSP)試劑盒

      尼洛替星Bis Benzimide Hoechst NO33258 熒光染料基因拼接圖譜*分析技術(shù)試劑盒

      尼亞希木脂素苷Bis Benzlimide Hoechst NO33342 熒光染料基因組DNA體外*甲基化(sss1)處理試劑盒

      黏黴酮Bis Benzlimide Hoechst NO33342 熒光染料基質(zhì)膠體法大鼠胚胎干繁殖試劑盒

      檸檬酸Decitabine 地西他濱/ 5-氮雜-2'-脫氧胞嘧啶核苷基質(zhì)膠體法人體胚胎干繁殖試劑盒

      牛蒡子 BFast Green FCF 固綠  Amresco基質(zhì)膠體法小鼠胚胎干繁殖試劑盒

      女貞甙Fast Green FCF 固綠  Amresco基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)膠原蛋白酶譜法(collagen-zymography)電泳分析試劑盒(MMP1/13)

      諾多星2-IP N6-異戊烯基腺嘌呤 (植物培養(yǎng)級)基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)酪蛋白酶譜法(casein-zymography)電泳分析試劑盒(MMP1/3/7/12/13)

      歐奕二烯酮 BOlaquindox 喹乙基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)明膠酶譜法(gelatin-zymography)電泳分析試劑盒(MMP2/9)

      攀登魚藤異黃酮Thioflavin T 硫黃素T基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)明膠酶譜法(zymography)電泳分析試劑盒

      泡桐素Ethyl violet 乙基紫基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)羧甲基轉(zhuǎn)鐵蛋白(CM transferrin -zymography電泳分析試劑盒(MMP7)

      霹靂蘿芙辛堿Dexamethasone sodium phosphate 地塞米松磷酸鈉基質(zhì)金屬蛋白酶3抑制劑(NNGH)

      啤酒甾Dexamethasone sodium phosphate 地塞米松磷酸鈉基質(zhì)金屬蛋白酶3抑制劑(NNGH)

      匹西狄AL-fucose L(-)巖藻糖基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑(TIMP1/2/3)逆相明膠酶譜法(reverse gelatin-zymography)電泳分析試劑盒(不含標(biāo)準(zhǔn)樣)

      葡萄 DNonivamide 辣椒素激肽釋放酶(KALLIKREIN)活性比色法定量檢測試劑盒
      Myla2059細(xì)胞蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human UBE4B ELISA Kit膠漿成熟因子β抗體

      微粒體谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶1(MGST1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human UBE2H ELISA Kit蛋白偶聯(lián)受體56抗體

      鈣調(diào)結(jié)合蛋白(CALD)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human UBE2K ELISA Kit腸和大腦特定同源蛋白2抗體

      神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(NRG-1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human UBL3 ELISA Kit甘氨酸轉(zhuǎn)運蛋白1抗體

      生長分化因子5(GDF5)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human UGCGL2 ELISA Kit生長激素釋放激素同源盒蛋白1抗體

      煙酰腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1(NOX1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human UGDH ELISA Kit血型糖蛋白δ抗體

      神經(jīng)肽Y受體Y5(NPYR5)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human UBXN10 ELISA Kit谷氨酸受體1抗體

       


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