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      銅藍(lán)蛋白(Cp)含量測試盒操作流程

      更新時間:2025-01-22點擊次數(shù):518

      銅藍(lán)蛋白(Cp)含量測試盒操作流程:

      1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

      2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

      3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

      4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

      5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

      6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

      7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

      樣品制備:

      1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。

      2). 過濾混濁溶液。

      3). 除去樣品中的CO 2 (過過濾)。

      4 ). 過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。

      5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。

      6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。

      7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。

      8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。

      9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。

      10).含脂肪的樣品用熱水提取。


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